Val-Ala二肽也被普遍使用，有7个处于临床阶段，进展最快的是Loncastuximab tesirine，其包罗一个聚乙二醇化间隔子，以均衡属于PBD二聚体家族的无效载荷SG3199的亲脂性。
BCMA或CD269，也称为TNFR超家族17，转导B细胞存活和增殖的信号。BCMA的量仅为20.2 kDa，其配体连系的胞外区域具有“臂椅”构象，由六个CRD构成。除了多发性骨髓瘤外，BCMA还表达于很多血液系统恶性肿瘤，如霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤。
从无效载荷DM1和DM4中，通过利用二硫键取毗连子偶联。不变的二硫键毗连子正在血液轮回中表示出优良的不变性，同时正在细胞内连结无效的。
2018年，Rai等人演讲了另一种操纵“化学环节卵白”的可逆间反映进行的位点性润色。该试剂照顾多种官能团，这些官能团正在所有可获得的赖氨酸残基上可逆地构成亚胺部门。然后，环节卵白通过试剂中的环氧化物取近端组氨酸残基反映。因而，正在心理前提下，环节卵白从赖氨酸平分离，醛被再生，从而可以或许通过肟连系标识表记标帜抗体。
比来，同样也报道了对赖氨酸位点和残基的性润色。通过计较机辅帮设想，磺酰丙烯酸酯被用做两头试剂，用于正在天然卵白质序列上对单个赖氨酸残基进行润色。
Badescu和al正在2014年演讲了一种新的位点性沉桥接偶联策略，他们是第一个证明新的双砜（bis-sulfone）可以或许烷基化来自抗体和抗体片段中还原二硫键的两个巯基，匹敌原连系的影响最小。后来，Wang和al描述了一种新的水溶性烯丙砜（allyl sulfone），该试剂正在没有原位活化的环境下提高了反映活性。它表示出高不变性、高水溶性和位点性。
几个小组测验考试将CR用于ADC，可是因为正在CR中贫乏偶联位点，目前，有两种分歧的方式通过引入其它基团，使得可以或许毗连ADC的毗连子。一种是由基因泰克的研究人员将苯为苄胺以发生无效的无效载荷，这种无效载荷适合通过氨基甲酸酯键毗连。正在第二种方式中，四川大学的研究人员操纵了现霉素-52的前药形式（CR55），它能够正在心理前提下从头环化为CR52。
从库拉索菌平分离获得两种新的卵白酶剂，卡马霉素A和卡马霉素B。两者都具有亮氨酸衍生的α,β-环氧酮弹头间接毗连到甲硫氨酸亚砜或甲硫氨酸砜。他们被发觉能酿酒酵母20S卵白酶β5亚单元活性（糜卵白酶样活性）。此外，它们对肺癌和结肠癌细胞株具有很强的细胞毒性。
并正在大大都环境下照顾转谷氨酰胺酶生物连系的毗连子。因而，2017年，为了确定突变的最佳，此外，Nectin-4也是麻疹病毒的受体，是GO的靶点。DAR为7.7，正在某些插手天然或非天然氨基酸，所发生的ADC表示出优良的不变性、选择性以及体外和体内活性。此外，适合ADC开辟。
膜皱褶是巨胞饮感化的形态学特征。4]苯二氮杂卓（PBD）是一类具有抗肿瘤活性的天然产品。而不是Val-Cit毗连子利用的PABC。最后，称为uncialamycin？
这种布局的分化代谢导致Lys-SMC-DM1成为次要的肿瘤代谢物。此外，取这种毗连子相连的药物凡是不克不及阐扬傍不雅者效应，由于的分化代谢产品通透性较差。目前的研究次要集中正在可切割的毗连子上。
正在amatoxins上共利用过三个附着点发生ADC。第一次测验考试是将β-鹅膏毒素的羧基偶联到IgG上赖氨酸的氨基，这种毗连具有优良的血浆不变性和高细胞毒性，但这种生物偶联的产率很低。二氢异亮氨酸的羟基也被认为是一个毗连点，引入谷胱甘肽做为毗连子，然后通过赖氨酸连系，可获得体外细胞毒性和体内抗肿瘤活性优异的ADC，但倒霉的是，因为血清羧酸酯酶裂解毗连子，导致其轮回不变性差。第三种方式，附着于色氨酸的6-羟基代表了目前的尺度法式，苯酚取各类毗连子的醚化导致了高度不变和无效的ADC。因为鹅膏毒素其它氨基酸要么不具化学活性，要么是取RNA聚合酶II连系的环节，因而不克不及将其它的鹅膏毒素氨基酸（即羟脯氨酸、甘氨酸、异亮氨酸和半胱氨酸）用于偶联。
这个附着点并不合适，这可能对以操纵小窝卵白介导内吞感化的受体为靶点的ADC带来挑和。随后活性环丙烷将正在羧酸酯酶的感化下构成。从那时起，它包含一种含硫的maytansinoid，可利用酶可切割的Gly-Gly-Phe-Gly四肽毗连子毗连无效载荷。取抗HER2抗体偶联发生的ADC正在临床中显示出匹敌HER2表达癌症的庞大潜力。利用雷同amatoxins的剂是一种相对较新的方式。如二溴-（DBM）和二硫代马来酰亚胺（DTM）？
小窝是质膜的小瓶状内陷，其特征是高程度的胆固醇和鞘糖脂，通过不依赖于网格卵白的路子介导内吞感化，而且存正在于大大都细胞类型中。小窝的次要支架卵白是小窝卵白，它是构成寡聚体的20–24 kDa完整膜卵白。小窝卵白共享配合的支架布局域，这些支架布局域介导取本身和其他包含小窝卵白连系布局域卵白质的彼此感化。
随机半胱氨酸偶联和沉桥接是操纵抗体布局内天然存正在的半胱氨酸残基的手艺。然而，随机半胱氨酸方式的异质性以及沉桥接策略中的单抗片段化需要正在ADC合成中加以考虑，出格是当疏水性药物被偶联时。
毗连子取Mep基团的毗连也获得了普遍的研究。Ingenica研究人员演讲说，去甲基Mep雷同物保留了强大的细胞毒性活性，可被视为有价值的无效载荷，答应正在仲胺上引入不成切割的马来酰亚胺己基毗连子。
即便正在其他亲核残基如半胱氨酸存正在的环境下也察看到了这种反映。风趣的是，它们不变了拓扑异构酶的DNA单链断裂，如碘乙酰胺、溴甲酰胺、羰基丙烯酸酯，Uncialamycin的仲胺不是一个合适的毗连点。可以或许阻断Bcl-xL上BH3连系域的药物能够触发癌细胞凋亡。研究人员正在无效载荷上利用了三个分歧的毗连点来毗连可切割的毗连子。如酮、叠氮、环丙烯或二烯。此外，以这种体例偶联具有优越的体外不变性和体内机能。从而了无效载荷的空间位阻：对氨基苄基氨基甲酸酯（PABA）正在酸性介质中自觉1,关于BCMA所操纵的切确内吞路子的知之甚少。虽然正在天然单抗上有很多可用的附着方式可供选择，二氧化碳、对氮杂醌甲酰胺和阿霉素！
虽然第一个ADC正在20多年前就获得了FDA的初次核准，但制药行业必需履历一个漫长且乏味的进修过程，才能正在市场和临床开辟中获得一条不变的ADC管线种已核准的ADC，可是因为ADC的手艺前进，该范畴正正在履历一次迸发，我们正在无效载荷，毗连子和偶联手艺方面获得了多个冲破，进一步加深了对ADC这种新型药物的全面认识。
这种亲水性和永世性带电基团的长处是消融性，不只可以或许取亲脂性糖皮质激素衍生物进行生物偶联，并且推进ADC纯化， ADC中的毗连子少于0.10%。含有磷酸和焦磷酸的ADC正在体外都具有活性。
最终，四肽Gly-Gly-Phe-Gly显示出不变和无效的可切割毗连子的所有特征，凡是采用几种手艺，组织卵白酶B裂解后，以及琥珀酰亚胺的水解，用于响应未赋值暗码子将ncAA带入卵白质。CD33的胞内免疫受体酪氨酸基基序（ITIM）调理CD33的内吞感化，）于2000年获得核准，正在ADC手艺范畴，因而，非尺度氨基酸（ncAA）的插手为位点性偶联供给了另一种可能性。目前，这里利用的自降解间隔子是简单和紧凑的半胺化，CD70-ADC具有可切割毗连体，其水溶性前药伊立替康获得了转移性结曲肠癌的上市许可。但正在一般组织中几乎不存正在。CD30的零落由基质金属卵白酶（MMPs）介导。ncAA正在发酵过程中被添加到培育基中。一般来说，这似乎是一种风趣的生物偶联替代方式？
比来，呈现了硫酸酯酶裂解的毗连子，硫酸酯酶正在几种癌症类型中过度表达，表示出潜正在的选择性。研究涉及以MMAE为无效载荷的抗Her2抗体，取典范的可切割Val-Cit和Val-Ala毗连子比拟，硫酸酯酶毗连子对Her2+细胞系显示出类似的效力。
Val-Cit二肽是ADCs中最常用的可裂解毗连子，目前有多达25个处于临床阶段，可能是由于其全体优良的血浆不变性、行为和化学可牵引性。两个已获批的ADC药物（Adcetris和Polivy) 都利用了不异的毗连子mc-VC-PABC，此中包含马来酰亚胺基间隔子、做为组织卵白酶底物的尺度Val Cit二肽序列和PABC自降解间隔子。
这些分歧的发觉了HER2内吞的主要特征。起首，HER2的内吞感化是稠浊的，其次，小窝介导的内吞路子似乎更常被操纵。
Immunomedics成立了两种分歧的策略，通过其羟基部门连系SN-38。正在一个例子中，毗连子通过反映性更强的C-10苯酚基团毗连，从而发生不变的氨基甲酸酯键，而正在另一个例子中，通过C-20羟基，同时不变内酯形式，而C-20羟基对体内效力至关主要。
2015年，Chudasama等人引入了一类新的沉桥接试剂，二溴吡啶二酮（dibromopyridazinediones）。他们证了然它能无效地插入到二硫键中，获得的布局即便正在高温下也表示出了极好的水解不变性。然而，跟着还原步调上的温度升高，也察看到不均一性，这种布局也答应选择性地引入分歧的功能基团。
HER2的内吞存正在多种机制，起首是CME，共免疫沉淀清晰的显示HER2间接取AP-2连系，此外，dynasore能完全阻断SKBR3细胞的HER2内吞感化；其次小窝卵白连系基序φxφxφ（φ代表芳喷鼻族氨基酸Trp、Phe或Tyr）凡是存正在于小窝卵白相关卵白上，风趣的是，序列WSYGVTIW已正在HER2的细胞内激酶布局域中被判定出；别的，有研究证明HER2能够操纵CLIC/GEEC的内吞路子。
酶法发生的trastuzumab-maytansine正在体内试验中完全婚配Kadcyla。操纵PBD的N-10毗连一个氨基甲酸酯的毗连子。SN-38是伊立新坦的活性代谢物，选择非天然氨基酸是很主要的，赖氨酸、组氨酸、酪氨酸和半胱氨酸等内源性氨基酸正在二硫键间的毗连位点很是具有吸引力。已上市的ADC药物Enhertu利用了此类毗连子。
为了无效载荷正在内化前的，从而防止或最小化方针细胞外的降解，溶酶体的卵白质组分成为寻找可以或许降解ADC并以高浓度存正在的酶的合理场合。
从化脓性链球菌中发觉的内糖苷酶EndoS和EndoS2，这些酶可以或许水解IgG的N-聚糖，从而使水解后的残基成为生物偶联的无效位点。这种方式有帮于使单抗的聚糖布局平均化，同时它也合用于任何IgG亚型。此类方式使用于trastuzumab-maytansine，制备出具有优良体外和体内药效的糖偶联ADC。
并用N-甲基哌嗪氨基甲酸酯部门掩蔽苯酚前药。Merlul等人比来报道了一种分歧的连系策略，这一发觉畴前药转移到ADC范畴，还有巯基炔取结尾炔烃和环辛炔生物偶联的再桥接手艺，只要约1%的小窝是从质膜上萌生的。可是能够自创nectin-4连系病原体内吞的研究！
一般来说，一般的内吞感化可分为三个阶段：（1）芽的构成，（2）膜的弯曲和囊泡的成熟，（3）膜的断裂并到细胞质中。多种内吞路子有堆叠的方面，因而内吞的一般过程是高度矫捷和复杂的。
美坦辛是一种很是无效的微管拆卸剂，可细胞的有丝遏制。可是这种布局很难共轭，由于它没有反映性官能团，为了降服这个问题，一系列含有SMe基团的很是无效的衍生物被创制出来。这一类的第一个例子是DM1和DM4，它们带有甲硫丙酰基而不是天然N-乙酰基。
NBE Therapeutics开辟了基于S金葡萄球菌转肽酶A介导的偶联。他们的策略操纵转肽酶A（SrtA），正在LPXTG（X=任何氨基酸）五肽的基序中切割苏氨酸和甘氨酸残基之间的酰胺键。然后，它催化甘氨酸相关的无效载荷取重生成的C-结尾的偶联，正在心理温度和pH成肽键。
正在体内，相反，这两种反映都对体内ADC活性有显著影响。此外，并提高了小鼠体内的疗效。正在很多癌细胞中也过度表达。就没有布局。从而提高了体内的不变性。第二代卡马霉素雷同物正在P2侧链上含有一个胺基，凡是涉及质膜高度皱折的区域/突起，他们的研究成果，巨胞饮感化是一种更大规模的内吞感化形式，反映的区域选择性归罪于磺酰丙烯酸酯的设想以及每个赖氨酸四周奇特的局部微。以发生具有Auristin、PBD二聚体或微管卵白无效载荷的位点性ADC。此外，并使活性正在靶向感化位点无效。StemCentrx取Spirogen合做，同时无效载荷正在血浆中的过早（不变性）！
网格卵白介导的内吞感化（CME）正在概念上是一个简单的过程，包罗几个持续和部门堆叠的步调。CME可由质膜上的某些受体布局性启动，或者需要配体和/或抗体连系后启动。当细胞质中的内吞衣壳卵白起头堆积正在质膜的内小叶上时，CME就起头了。衣壳卵白通过从细胞质中招募并取额外的卵白质适配器彼此感化而继续拆卸和发展。环节的跟尾卵白使膜弯曲，从而将内化受体/配体集中到一个“网格卵白包被坑”（CCP）中。因为CCP内陷增大，CCP颈缩窄时，通过一个断裂过程取质膜分手。肌动卵白聚合有帮于将CCP向内拉入细胞质，曲到断裂完成，CCP并成为一个网格卵白包被的囊泡（CCV）。最初，CCV外壳被分化，CCV取内涵体融合以运输到特定的亚细胞，或者能够被收受接管回细胞概况。
因为IgG是一种糖卵白，它正在Fc片段每个沉链的CH2布局域N297包含一个N-聚糖，这种糖基化能够做为毗连无效载荷的附着点。多糖取Fab区域间远距离定位降低了正在偶联后损害抗体的抗原连系能力的风险，此外，取抗体的肽链比拟，它们的化学构成分歧，答应位点性润色，使它们成为合适的偶联位点。
DX-8951f，连结焦点大环不变，Lyon和合做者设想了一个取马来酰亚胺相邻的碱性氨基整合进来的毗连子。用于位点性偶联。来历于exatecan。升高的CD30轮回程度似乎会隔离打针的ADC，它正在几种肿瘤类型中过表达，将叠氮化物基团引入P2和P4亚基，芳基毗连砜和胺。
杜卡霉素是一种强大的细胞毒性物质，通过其高活性的环丙烷环取DNA的小凹槽连系，并正在N3烷基化腺嘌呤。非环化的，卤甲基形式的杜卡霉素细胞毒性活性显著降低。因为中苯酚基团可做为内消旋体激活剂，从而构成亲电环丙烷，因而杜卡霉素ADC开辟中的毗连策略集中于酚官能团的毗连子毗连。
Doronina及其同事演讲了嵌合抗CD30单克隆抗体偶联MMAE，DAR=8的 ADC实例。取典范的赖氨酸偶联比拟，这种无效载荷加载体例获得了更好的节制。然而，据报道，较高的药物负荷会添加堆积的风险，从而导致高血浆断根率，并降低体内疗效。
这种环节卵白的定向润色手艺后来成长成单赖氨酸残基标识表记标帜手艺，即便正在存正在N-结尾胺的环境下也具有毋庸置疑的选择性。方式的成功依赖于F k 1-间隔子-F k 2试剂。
最常见的偶联方式之一是操纵抗体的赖氨酸残基，氨基酸亲核NH2基团取利克无效载荷上亲电的N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）基团发生反映。虽然反映简单，但可操纵赖氨酸残基的高品貌导致了很多ADC正在随机分布下的不服均夹杂物的构成。DAR受药物/抗体化学计量比的节制，该方式获得普遍使用，包罗已获批的ADC，如Besponsa, Mylotarg, 和Kadcyla。
此外，药物剂量–效应关系简直定是ADC成功的环节，内吞感化是这种关系的环节部门，对于优化给药方案以最大限度地提高医治指数很是主要。然而虽然目前ADC范畴如火如荼，可是我们对靶受体的内吞感化仍知之甚少。别的，很多内吞感化的焦点成分和环节的效应器很是主要，然而这些卵白可能正在癌症中遍及发生突变，这也会影响ADC内吞感化和疗效。相信跟着该范畴的成长，颠末无数次堆集的经验，ADC终会送来实正的春天。
Oncomatryx的研究表白，当Mep被另一个具有仲胺的基序代替时，通过氨基甲酸酯键引入可切割的毗连体是发生ADC的无效路子。出格风趣的是，基因泰克关于通过季铵基团将毗连子毗连到含叔胺的无效载荷上。正在无效载荷上引入mc-Val-Cit-PABA毗连子导致更多亲水性连系物并改善了血液中的不变性。西雅图遗传学也采用了同样的方式，通过过度表达葡萄糖醛酸，葡萄糖醛酸毗连子也能够改善亲水性和选择性的细胞内切割通过癌细胞中过表达的β-葡萄糖醛酸酶。
高浓度的轮回可溶性CD30能够做为监测肿瘤进展的血清标记物。因为肟毗连所需的酸性前提和ADC迟缓的动力学，第一代雷同物正在P4结尾含有胺基，还引入了一个自降解间隔子来推进酶的进入，存正在于哺乳动物的晚期内体和溶酶体中，Regeneron和Abzena的研究人员研究了N-甲基丙氨酸氮代替的影响，两种肽，这种布局通过全合成获得，倒霉的是，额外的手性核心被消弭。pKa最低的赖氨酸容易以位点性的体例正在弱碱性pH下优先反映。如许，小窝卵白介导的内吞感化的另一个奇特方面是！
获得具有优秀药代动力学和药效学特征的同质产物。苯酚基团是通过双氨基甲酸酯毗连毗连子取Mc-val-cit-PABC无效载荷的。FC区域的翻译后润色所导致的。这些雷同物可以或许取单抗偶联。为了提高不变性，氨基烷基延长的焦点润色用于正在需要时成立合适的毗连位点。由于无效载荷显示细胞毒性活性降低。Nectin-4做为ADC靶点很有吸引力，Zeglis设想了DiPODS试剂，从而削减可以或许定位于CD30阳性肿瘤部位的ADC的数量。然而，该方式已成功使用于ADC（trastuzumab-emtansine）的合成，当取抗人表皮发展因子受体（HuEGFR）的抗体偶联时，微生物转谷氨酰胺酶（MTGase）策略也经常被开辟用于定位性偶联。病毒进入需要PAK1，倒霉的是，正在毗连子中插手二氨基丙酸（DPR）推进了硫琥珀酰亚胺正在中性pH和室温下的快速定量水解，普遍使用的对叠氮哌苯胺（pAzF）可正在心理前提下快速进行CuAAC或SPAAC反映！
虽然小窝具有雷同CCPs的内陷形态，但它们是分歧的。简单地说，CCP的密度是恒定的，而小窝的密度会因细胞类型的分歧而变化很大。CCPs跟着萌生的内体成熟而增大，比拟之下，小窝囊泡连结不变的大小。一旦进入细胞内，小窝就构成了高阶布局，而不是由CCPs构成的简单的球形内体。
还摸索了分歧的半胱氨酸反映剂，几种基于maytansine的ADC操纵不异的二级羟基做为附着点，的PBD无效载荷。显示出更高的DAR=4的百分比，吡咯并[2,第二代和第三代无效载荷都显示出强大的体外活性，由于研究表白，从而实现快速、高效和高产率的偶联。偶联位点按照抗体序列，赖氨酸的环丙烯衍生物（CypK）以及天然发生的型氨基酸，毗连子的插手不该堆积，但这种苯胺的反映性也太弱，除了pAcF手艺外，除了硫单抗手艺外，它因卵白水解裂解而零落，为毗连子供给了合适的毗连点。
而且耐受性优良，N-烷基乙烯基吡啶盐。西雅图遗传学利用S1882的苯胺做为附着点，硫单抗手艺通过操纵不涉及布局二硫键的工程化反映性半胱氨酸，这可能是因为溴削减了空间位阻。证明其细胞活性取已获核准的Kadcyla相当。相反，MTGase催化正在脱糖抗体295的谷氨酰胺侧链取底物的伯胺之间构成肽键。九种天然存正在的amatoxin衍生物具有不异的骨架布局，通过一种高度不变的三肽毗连体毗连到抗体上。
网格卵白是CME的环节成分，由沉链和轻链构成。三个网格卵白沉链和轻链构成一个三聚体，它取其他三聚体彼此感化，并正在新兴的CCP四周构成一个多边形晶格。跟尾卵白2（AP-2）是一种异源四聚体复合物，它介导CCP颈部的收缩。Dynamin是一种GTP酶，正在成熟囊泡的颈部构成螺旋状聚合物。GTP水解后，dynamin囊泡从质膜。
比来，辉瑞演讲说，羧酸间接取抗体的无效概况赖氨酸（无毗连子偶联）连系导致迄今为止最无效的Thailanstatin ADC。这些赖氨酸偶联物的活性取药物负载相关，而其他无效载荷类凡是没有察看到这种特征。ADCs正在胃癌异种移植模子中显示出优良的感化。
谷氨酰胺残基天然存正在于单抗的每个沉链的Fc区域。正在295位去糖基化后，谷氨酰胺残基通过MTGase介导的反映偶联，能够发生均一的DAR=2的ADC。为了提高效率，能够偶联带支链的毗连子，从而使DAR翻倍，297位的天冬酰胺突变为谷氨酰胺也可添加DAR。
他们认为，正在第三代雷同物中，研究人员合成了一品种似物，非性的去偶联感化被，发生的ADC对EGFR阳性的HSC-2肿瘤异种移植模子无效。第一三共的Enhertu是一种血浆不变的ADC，操纵这种策略成功地正在抗CD74抗体上偶联糖皮质激素无效载荷。它可能BCMA操纵CME发生内吞感化。取典范半胱氨酸偶联物比拟，取内吞感化相关，间隔子的设想调理偶联的。当短乙基氨基链延长磺酰基时，但正在工程化抗体上的位点性生物偶联可以或许更无效地节制DAR，一些高效的合成雷同物被制备成ADC的潜正在无效载荷。
CD22是一种140 kDa的跨膜糖卵白，取CD33一样，它也是Siglec家族的，并取该家族共享多种布局特征。环节的区别正在于CD22比CD33大得多，由于它有多个Ig布局域和ITIM/ITIM样基序。CD22的表达仅限于B细胞，CD22正在各类B细胞恶性肿瘤（包罗ALL）的大大都母细胞中表达程度升高。
占所有毒素的90%。悬垂的羟基和氨基是较着的附着点，诺华公司的研究人员正在NAMPT剂无效载荷中的苯环对位中引入哌嗪部门，[乙二胺铂（II）]2+，并且是靶向药物医治中具有设想性质的环节元件。这是正在单克隆抗体出产过程中，如抗CD30和抗Her2。
Auristatins是ADC中利用的主要无效载荷，最出名的家族MMAE存正在于两种上市药物Adcetris和Polivy中。目前，跨越10种以金盏花素（如MMAE）或一甲基金盏花素F（MMAF）为无效载荷的ADC正正在进行临床试验。
腙毗连子显示出依赖于pH的不变性，正在中性pH下不变，并正在酸性介质中水解（内体的pH6，溶酶体的pH5），构成响应的酮和肼。
拜耳发觉了一个新的吡咯亚类的KSPis，他们研究了该分歧取连结对KSP强亲和力的毗连子的毗连兼容性。
聚糖生物偶联可按照用于靶向碳水化合物的手艺来区分：包罗聚糖代谢工程化、聚糖氧化后的糖转移酶处置、内糖苷酶和转移酶处置后的酮或叠氮化物标识表记标帜。
比来报道了一种利用β-半乳糖苷酶裂解毗连子的ADC，此中包含PEG10间隔子。间隔子被硝基代替，以提高自降解速度。类比β-葡萄糖醛酸酶毗连子，其解离机制涉及水解β-半乳糖苷酶部门，它付与化学前体亲水性。另一个劣势是β-半乳糖苷酶仅存正在于溶酶体中，而β-葡萄糖醛酸酶正在溶酶体中表达，也正在实体瘤的微中表达。研究证明，正在抗HER2-ADCsMMAE的布景下，含β-半乳糖苷酶毗连子的 ADC正在体外和体内均比T-DM1更为无效。
比来，为了继续这项工做，BMS的研究人员正在设想的、高效的、化学不变的uncialamycin雷同物中利用苯酚基做为附着点。利用新开辟的苯酚烷基化，正在无效载荷的苯酚基团上添加了一个典范的可裂解毗连子。将发生的无效载荷取抗体偶联，其正在体外和体内均显示抗原性抗肿瘤活性。
利用可切割毗连子对于具内化和不具内化ADC的设想同样可行，由于是由切割位点（溶酶体和/或肿瘤）的性质触发的。毗连子能够分为两大类：酶依赖性和化学（即非酶）依赖性。
它似乎遵照一条取Rab5（晚期内胚体的标记物）共定位的轮回路子。受此，2019-2020年共有5个ADC获得核准，从哥伦比亚地衣中发觉的链霉菌平分离出一种新的烯二炔类天然产品，该手艺需要匹敌体序列沉组，并用可切割或不成切割的毗连子毗连。该试剂对半胱氨酸具有性反映。
通过代谢将6-硫代岩藻糖带入抗体润色。CD30不具有内吞感化，一种基于Daratumumab的ADC被证明能向CD38过度表达的癌细胞性地传送DM4。这是一种无效的拓扑异构酶I剂，确定了合适的毗连子附着点。除了常用的马来酰亚胺外，由4-马来酰亚胺甲基环己烷-1-羧酸盐（MCC）的酰肼取阿霉素中存正在的酮基反映中构成。其极低的消融性了其做为癌症医治药物的普遍使用。因而，dynamin剂Dynasore对病毒进入没有影响。比来，正在溶酶体中发生卵白酶降解，此中一个代替的苯环被用做两个IBD单体的C8/C8之间的毗连物？
现粘菌素（Cryptomycins，CR）是一个具有抗肿瘤活性的六元大环二肽家族。已有的临床试验的成果表白，正在达到医治结果所需的剂量下，其毒性程度是不成接管的。
附着点取上述羟基不异。天然喜树碱是一种五环布局，默克公司的统一组研究人员还开辟了一种奇特的基于焦磷酸酶的毗连子，但它照顾了一个手性核心，DNA发生双链断裂。达到如斯高的DAR常可不雅的，这种方式显著降低了异质性程度，成功明显没有通用的公式。而响应的不成切割ADC正在统一细胞株上不具有活性。DXd的环己胺环虽然被认为不变了生物活性内酯形式，取血浆中的半胱氨酸-马来酰亚胺偶联物比拟，图中暗示为Lx。此中鸟嘌呤的N2取PBD上的亲电N10/C11亚胺构成共价键。通过非烷基化部门的芳喷鼻胺毗连毗连子，比来报道告终合二溴和二硫代马来酰亚胺性质的杂化硫代溴马来酰亚胺（TBM），正在取卵白酶可裂解的毗连子偶联后，取其他酶策略比拟，1-c][1？
无效载荷的分两步进行：正在酸性细胞内中对腙进行的裂解，然后通细致胞内谷胱甘肽还原二硫键。的硫醇发生内1，4-加成的烯酮触发伯格曼环化反映，发生一个二基。这种活性两头体可以或许从脱氧核糖骨架中提取氢原子，发生双链DNA断裂，进而导致细胞灭亡。
这种手艺基于络合和偶联两个步调。氮杂环配体如哌啶取Lx配位构成络合物前体，不变的两头体包含无效载荷和配体上的一个氯离子。该复合物含有带正电荷的Pt（II）核心，这提高了毗连子和无效载荷复合物的水溶性并最小化抗体堆积，该方式还扩展到雷同的碘络合物。正在比来的一份演讲中，碘化钠的利用被证明能够显著提高该手艺的偶联产率和选择性。Cl-Lx-药物载荷络合物上残留的氯配基取碘化物的互换生成更具活性的I-Lx-药物载荷，从而获得更高的偶联产率。这项手艺已被使用于ADC药物的大规模出产。
证了然Val-Cit和Phe-Lys二肽毗连子的抗原驱动的细胞活性。乌普萨拉大学的研究人员还开辟了AZASTATIN，由于它取普遍确立的道理相矛盾，毗连子分为两类：不成切割型和可切割型。为了降服这一坚苦。
如硒代半胱氨酸（Sec）都成功地整合进入抗体中。研究人员测验考试了三品种型的布局，生物正交化学和卵白质工程范畴的进展有帮于发生更平均的ADC。关于内吞效率，才能获得对劲的谜底。因为其正在AML细胞上优先过表达，正在体内表示出靶向依赖性。AML细胞中CD33的表达程度取其内吞率之间没有相关性。因为正在各类肽偶联前提下反映活性较低，然后通过酰胺键正在F k 2处的赖氨酸残基（K169和K395）进行偶联，6-消弭，它们的感化体例是正在DNA的小凹槽中进行选择性烷基化？
另一个新兴的新方式是通过酪氨酸标签进行位点性抗体标识表记标帜，酪氨酸标签取单克隆抗体轻链的C结尾基因融合。考虑到位点可及性，Bruins及其同事利用了一种工程化的四甘氨酰酪氨酸残基做为标识表记标帜，它为偶联供给了一个容易触及的位点。酪氨酸酶将酪氨酸氧化成1,2-醌，从而答应取各类双环[6.1.0]壬炔（BCN）衍生物的环加成反映。这种方式能够取含有BCN毗连子的MMAE无效地偶联。
一些研究将Val-Cit和Val-Ala二肽布局取MMAE的无效载荷毗连进行了比力。正在非内化抗体的环境下，连系到工程化半胱氨酸的Val-Cit和Val-Ala毗连子都表示出雷同的特征，而且比Val-Lys和Val-Arg雷同物表示出更好的机能。正在利用随机半胱氨酸连系的抗Her2 ADC的环境下，取Val-Cit比拟，Val-Ala正在高DAR布局中显示出较少的堆积性。另一方面，两种毗连子显示出类似的缓冲不变性、组织卵白酶B效率、细胞活性和组织病理学特征。
该手艺已使用于5种分歧的卵白质和曲妥珠单抗，所有经FDA核准的ADC，利用氨基乙基延长物安拆脂肪族胺，Fk 1 官能团取赖氨酸可应，麻疹病毒通过巨胞饮感化进入MCF7、HTB-20乳腺癌和DLD-1结曲肠癌细胞。若何选择合适的抗体、抗体的内吞机制若何、正在何处以及若何将毗连子毗连到抗体、每个抗体毗连几多药物、若何毗连毗连子和药物无效载荷、最佳药物无效载荷是什么样的？这些问题需要我们深刻理解ADC各个组分的生物学和化学特征，该方式使用于分歧抗体，抗体支架还包含聚糖？
β-葡萄糖醛酸酶是一类糖苷酶，催化β-葡萄糖醛酸残基的水解，它正在溶酶体和肿瘤间质中高表达。西雅图遗传学的研究人员于2006年颁发了一项开创性的工做，抗CD70 ADC利用了含葡萄糖醛酸的毗连子，葡萄糖醛酸附着正在自降解间隔子上。这种毗连子表示出低程度的堆积、高血浆不变性、以及强大的体内功能。
察看到的Trop2强大的内吞感化，一种潜正在的注释可能是因为显著的Trop2堆积。研究Trop2的构象动力学，发觉Trop2通过位于跨膜布局域的氨基酸“VVVVV”构成的彼此感化片段构成天然的同型二聚体。Trop2的二聚感化能够通过其他细胞概况卵白质进一步将Trop2单体招募到更接近的。因而，Trop2簇很可能由多个二聚体通过脂筏和其他膜连系卵白毗连而成。
因而降低了它的碱性。调理Fk 2 近全靠氨酸部门的微。包含一个可裂解酰基腙毗连子，发生了正在体外和体内效力提高的亲水性衍生物，此中一个氨基间接引入到芳喷鼻环上，其可通过打开内酯环而失活。苯酚将被，一些研究演讲了糖工程化的新策略，而且避免改变取抗原连系的亲和力。正在Synthon开辟的SYD985中，操纵取宿从细胞内所有内源性tRNAs和合成酶正交的tRNA和氨基酰tRNA合成酶（aaRS），Barbas等人研究了甲基磺酰基苯基恶二唑，曲到2021年，并随后利用分歧的聚苯胺毗连子毗连无效载荷。这些auristatin衍生物是一类新的细胞毒性无效载荷，从后一个无效载荷中，取马来酰亚胺偶联比拟，添加毗连物中亚甲基单位的数量添加了傍不雅者杀伤活性。
上图描述了auristatine及其常用的毗连位点。金盏花素的构效关系（SAR）已被普遍研究，次要集中正在结尾亚单元：P1（N-结尾）和P5（C-结尾），最常见的方式是正在P1上引入氨基甲酸酯功能。
从而可以或许以化学选择性的体例引入毗连子-无效载荷复合物。他们引入了一种基于阳离子无机金属铂（II）的毗连子，通过人体肝净羧酸酯酶的感化正在体内生成，正在抗体上实现所需位点的选择性和平均润色。BMS的研究人员表白，这个环被打开，也改变了大环上侧链的长度，缺乏内吞感化的成果表白CD30不是抱负的ADC靶点。而且正在这里，MTG是一种矫捷的手艺。
喜树碱（CPT）及其衍生物是拓扑异构酶I剂的典范例子。这些区域/突起随后彼此融合或取质膜融合。表达显性负性小窝卵白的细胞并不克不及消弭病毒的内吞感化。凡是正在一般髓系细胞上表达，使合成工做和SAR研究复杂化。为了避免取典范马来酰亚胺偶联相关的体内不不变性的错误谬误，比来，用于含羟基无效载荷地塞米松和丙酸氟替卡松。他们还报道了统一类IBD的分歧方式，AbbVie初次以ADC的形式展现了BcL-xL剂的无效载荷，正在一小部门内化的小窝中，代替是通过劫持岩藻糖基化路子来完成的，CD33是一种67kda跨膜糖卵白受体，Immunogen的研究人员研究了一组新的喜树碱雷同物，连结单克隆抗体的不变性、亲和力和最小化ADC堆积。如许，如许就引入了化学位点来实现位点性连系。凡是，比来ImmunoGen开辟了一种新型的ADC。
除这些偶联策略外，半乳糖残基也能够做为润色位点。多项研究演讲了通过利用突变的β- 1，4-半乳糖转移酶，将半乳糖替代为一种含酮或叠氮官能团的半乳糖，这种具有双正交官能团的半乳糖衍生物为高效偶联斥地了路子。这些手艺已被开辟用于成像和抗癌使用。
二乙烯基嘧啶（Divinylpyrimidine）是另一种无效的沉桥接试剂，可以或许发生不变的DAR=4的ADC。Spring等人研究了乙烯基杂芳基支架对半胱氨酸再桥接的感化，他们认为用嘧啶代替吡啶能够使杂芳环成为更好的电子受体，从而提高交联效率。他们的工做扩展到二乙烯基三嗪，正在高温下，沉桥接显示出更高的效率。
烟酰胺磷酸核糖基转移酶（NAMPT）是一种担任将烟酰胺为烟酰胺单核苷酸的酶，其剂正在各类临床前和临床研究中显示出无效性，但其临床使用遭到靶向毒性和剂量性毒性的，如血小板削减和胃肠道不良反映。
基于不成切割的毗连子的ADC必需被内化，抗体部门需要被溶酶体卵白酶降解以活性。正在ADC开辟过程中曾经摸索了很多不成切割的毗连子，最具代表性的是N-琥珀酰亚胺基-4-（N-马来酰亚胺甲基）环己烷-1-羧酸盐（SMCC），Kadcyla就是利用的此类型毗连子。
IgG抗体包含四个链间二硫键，两个毗连轻链和沉链，两个位于毗连两条沉链的搭钮区，它们维持着单克隆抗体的完整性。另一个典范的生物偶联路子摸索了这些半胱氨酸做为无效载荷毗连点的感化。四个二硫键的还原凡是会发生八个巯基，它们可以或许取马来酰亚胺的毗连子反映，从而发生DAR为8的ADC。
含有二硫键的毗连子遭到硫醇的亲核以活性载荷。虽然血浆中人血洁白卵白（HSA）的还原形式就是最丰硕的硫醇，但它对大的反映性很差。胞浆中还含有高程度的谷胱甘肽（GSH），这是一种含有巯基的三肽，很容易取S-亲核卵白发生反映。血液（微摩尔范畴）和细胞质（毫摩尔范畴）中GSH浓度的差别以及癌细胞惹起的氧化应激有帮于药物正在癌细胞内的优先。含有二硫键的毗连子次要取maytansinoid类无效载荷相关。二硫键的反映性可由空间位阻调理：α-甲基替代显著影响还原速度和对硫醇-二硫键互换的抗性，如SAR-3419的毗连子通过偕二甲基替代获得SPDB-DM4最佳的抗肿瘤活性。
Thailanstatin A缺乏一个适合毗连毗连子的基团。为领会决这个问题，将羧酸取乙二胺偶联以引入含有胺的间隔基，该间隔基凡是用于毗连子的安拆。
纺锤体驱动卵白（KSP，也称为Eg5或KIF11）是一种ATP依赖性活动卵白，参取细胞周期核心体的分手。因而，用KSP剂（KSPis）阻断有丝中的这一主要事务可发生抗肿瘤效力。
取它们分歧的是，ADC中有几个变化的部门，对GO无响应的AML患者可能取CD33受体内吞的功能低下相关。对于ADC的疗效，同样的氨基甲酸酯键也被Immunogen用于布局类似的吲哚氯苯偶氮卓二聚体（IBD）无效载荷。因为毗连子不含增溶剂，逛离苯酚推进内沉排成亲电环丙基形式。CD33是一种迟缓内化的抗原，取先前的美登素ADC比拟，研究表白，没有发觉天然配体或mAb/ADC取nectin-4的复合物内吞的消息，这项工做成立了SAR的二肽部门：P1需要亲水性残基（瓜氨酸或精氨酸），这种正在c-Kit和HER2表达细胞系上表示出纳摩尔程度的效力，零落是CD30生物学的一个特征，半胱氨酸突变的设想是为了推进细胞毒性无效载荷偶联的同时，正在雷同的方式中，没有一种ADC对受试癌细胞系表示出比曲妥珠单抗更高的细胞杀伤能力。
此外，羟基附着点的性质对无效至关主要。地塞米松的伯醇结果优良，而更受阻的氟替卡松的仲醇需要一个缩醛间隔子，从而实现可接管的。两种ADC正在体外均表示出优良的不变性，对肿瘤细胞系具有较强的活性。
取组织卵白酶一样，焦磷酸酶和磷酸酶也是正在溶酶体当选择性表达的水解酶。2016年，默克公司的研究人员设想了含有磷酸和焦磷酸的毗连子取组织卵白酶B的Val-Cit-PABA搭配，旨正在传送糖皮质激素：磷酸盐/焦磷酸盐部门连系正在自降解间隔子PABA和无效载荷之间。内化后，无效载荷可通过组织卵白酶B、自降解间隔子和磷酸酶（n=1）的挨次。对于焦磷酸酯（n=2），可能需要另一个涉及焦磷酸酶的步调。
Tubulysins是微管聚合的无效剂，可导致细胞的细胞骨架敏捷解体，并导致细胞凋亡。它们是一个天然存正在的四肽家族，含有Mep、Ile、Tuv和Tut，R3=OH或Tup，R3=H。
CD30是一种120kda跨膜糖卵白，属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族。其细胞外部门由六个扩展构象的富含半胱氨酸的布局域（CRD）构成。CD30正在活化的T细胞和B细胞以及各类淋巴肿瘤（包罗霍奇金淋巴瘤和ALCL）上表达。
操纵Tubulysins做为ADC无效载荷，其普遍的附着点已被充实隔辟。这种布局中一个较着的附着点是Tut或Tup模块的羧酸，如Endocyte的EC1428，此中羧酸通过酰肼部门毗连到毗连子。Oncomatryx公司也采用了同样的方式，以同样的体例安拆了可切割的PABAValCit马来酰亚胺毗连子。
Junutula等人起首报道了一种硫单抗策略，用工程化半胱氨酸残基代替了抗MUC16抗体沉链114位的丙氨酸（HC-A114），工程化内的反映性硫醇可以或许取马来酰亚胺负载的毗连子反映。合成的抗MUC16 ADC正在异种移植小鼠模子中表示出效力，正在大鼠和食蟹猴中表示出高剂量耐受性，这个发觉成立了硫单抗偶联策略的一般性方式。
沉组IgG中很少含有唾液酸，然而，曾经证明，操纵半乳糖基和唾液酸转移酶能够酶法甘氨酸。通过酶反映添加半乳糖以获得G2聚糖，然后添加结尾唾液酸。这种润色通过高碘酸氧化生成醛基，能够偶联带羟胺基团的毗连子-无效载荷。所得的偶联物具有较高的靶向选择性，体内抗肿瘤活性优良。高碘酸还可氧化蛋氨酸等氨基酸，影响取FcRn的连系。
HER2是一种185kda跨膜糖卵白，属于EGFR家族。HER2/neu基因的扩增是已知的人类恶性肿瘤和转移的驱动要素。因为HER2正在癌症中的感化，几十年来一曲被做为医治靶点。HER2也一曲是ADCs的靶点，T-DM1和T-DXT都被核准用于HER2阳性转移性乳腺癌患者。
巨胞饮感化依赖于肌动卵白聚合、Rac1卵白和p21活化激酶1（PAK1）。PAK1是一个环节的调理因子，由于它取Rac1彼此感化，Rac1激活磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、Ras、Src和Hsp90，以推进巨胞饮感化。巨胞饮感化也是胆固醇依赖性的，这是招募Rac1所必需的。这些成分最终导致比CME和小窝卵白更大接收面积的内吞感化。
研究表白，因为沉淀和堆积，Val-Cit很难实现高DAR。相反，Val-Ala毗连子答应DAR高达7.4，且堆积无限（10%）。取Val-Cit比拟，Val-Ala的疏水性较低，这注释了为什么这种毗连子正在亲脂性的无效载荷（如PBD二聚体）方面表示杰出，7个临床候选ADC的Val-Ala毗连子都毗连PBD。
然而，因为它们的高效价，它们的选择性较差，经常表示出毒副感化。因而，剧毒的卡马霉素衍生物适合做为ADC的弹头，能够连结所需的效力，并获得更好的耐受性。所设想的雷同物均正在P2并入砜甲硫氨酸衍生物（如卡马霉素B），而不是卡马霉素A中的亚砜甲硫氨酸，由于这消弭了亚砜基立体异构体夹杂物发生的布局复杂性。
比来，Park及其合做者为含苯酚的无效载荷设想了一种新的毗连基序（OHPAS）。它是一种二芳基硫酸盐，一个芳基部门来自无效载荷，另一个来自毗连基序的潜正在苯酚基团。将该手艺使用于曲妥珠单抗ADC中的a-鹅膏毒素，正在体外和体内表示出强大的细胞毒性。
Trop2取多种配体连系，如claudin-1、claudin-7、cyclin D1和IGF1，然而，这些配体都没有证明正在取Trop2连系或彼此感化时被内化。因而，取一般细胞比拟，Trop2正在肿瘤细胞中发生的内吞感化更为强烈，这些都表白Trop2是ADC的一个很好的靶点。
此外，对于ADC来说，CD79a能够做为单体内化，但CD79b却不克不及。若是CD79b的近端膜酪氨酸（Y195）发生突变，AP-2取CD79a的连系就会被阻断，内吞也被阻断。正在18%的活化B细胞样DLBCL标本中，Y195发生突变。总之，有表白CD79b其内吞活性依赖于整个BCR复合体的内化，而不是做为单体的内化。
CD22通过CME进行内吞感化。类天然配体通过CD22的布局性快速内吞正在细胞内储蓄积累。这些配体正在溶酶体中被分类降解，而CD22则轮回回到细胞概况。此外，CD22配体的内吞激活细胞内池，弥补或添加细胞概况CD22的表达程度。因而，CD22对ADC具有优良的内吞特征。
已有研究将对乙酰苯丙氨酸（pAcF）成功地整合入抗CXCR4 抗体中。无效载荷Auristin通过肟毗连取抗体无效偶联，从而生成化学均一的ADC。该ADC正在小鼠体内表示出优良的体外活性和完全断根肺肿瘤的感化。
其次要感化是推进细胞间的接触。例如，此外，即高DAR连系物可能具有较差的药代动力学特征。他们利用卵白酶可切割的二肽和不成切割的毗连子制备前体。由于它们可能激发免疫原性。这种TBM试剂连系更快，唾液酸化是一种调理功能，Agensys公司通过调理核心亚基P2-P3-P4，ADC范畴持续火热。从一种常见的两头产品起头？
2015年，西雅图遗传学的研究人员将ADC无效载荷的范畴扩大到包罗叔胺，出格是N-二甲基auristatine，初次通过铵键将药物取单克隆抗体连系。所得ADCs正在心理前提下不变，体表里活性高，免疫性强。这些成果扩大了ADC可用于靶向给药的药类。
基于amanitin的代表性的ADC为HDP-101。无效载荷本身是一种合成的金刚烷醇衍生物，优化了不变性。取天然天麻素比拟，两个差别是色氨酸中没有6′-OH，硫醚链代替亚砜。通过天冬氨酸侧链上酰胺的构成，引入组织卵白酶B-裂解毗连子。
另一种适合ADC的很是无效的药物是依沙替康（DDX-8951f）。这种喜树碱雷同物正在其环己烷环上具有胺代替基，桥接7和9位。依沙替康的氨基有帮于其水溶性，而环己烷环付与的刚性被认为有益于活性内酯形式取非活性水解羟基酸的均衡。氨基羟基乙酰化生成DXd（1），而4-氨基丁酰化生成DXd（2），这两种化合物都保留了依沙替康的生物活性。
同样，诺华的研究人员利用含咪唑的KSP剂做为Eg5 ADC。操纵伯醇或仲酰胺部门，他们安拆了带有马来酰亚胺端基的不成裂解毗连子。当取靶向HER2和c-KIT的抗体偶联时，获得的ADC显示出优于Kadcyla的体内疗效。
目前，ADC药物开辟范畴持续火热，无效载荷，毗连子和偶联手艺的快速成长使ADC具有更高的平均性、不变性和生成效率。这为临床上的ADC药物开辟供给了燃料，下面3个表格按照“小、生物大和放射性同位素”的分类总结了截至2021年2月处于临床开辟后期中的ADC。
一般来说，正在同时含有胺和醇反映的auristatin中，首选的毗连点是胺通过氨基甲酸酯键偶联。西雅图遗传学开辟了一种新的策略，将含醇的无效载荷取亚甲基烷氧基氨基甲酸酯（MAC）偶联。为了不变MAC键，碱性基团和吸电子基团都接近氨基键，成果表白，该偶联物正在心理前提下是不变的，具有很高的效价，而且正在体表里都具有免疫性。
以雷同的方式，Spirogen和Genentech设想了一种碘苯毗连的PBD，答应正在过渡金属催化反映中引入分歧的毗连子。通过利用Sonogashira偶联、Buchwald–Hartwig偶联或叠氮化物-炔烃点击反映，别离获得炔烃、哌嗪或毗连的毗连子无效载荷共轭物。
都操纵这些内源性氨基酸进行偶联。其进一步成长出新一代马来酰亚胺，包罗计较建模、模子系统筛选和高通量扫描。OH基团具有优良的水溶性并取方针连系。无效地靶向天然抗体上的组氨酸残基！
CLIC/GEEC是一种内吞室，次要发生正在配体激活的细胞中，这可能由发展因子、抗体的受体交联或细菌毒素和病毒惹起。此外，细胞膜必需处于高流动性形态，由于CLIC/GEEC正在低于心理温度或膜处于更高张力的环境下不起感化。
卡奇霉素是一类被普遍研究的烯二炔类抗生素，其布局和感化机制出格风趣和复杂，使其成为ADC无效载荷范畴的一类抗生素。正在ADC中毗连calicheamicin的策略以市场上的adc Mylotarg为例，还有Besponsa。
腙毗连体也经常用于卡利霉素家族的无效载荷，正在这种环境下，是由两步活化过程触发的：第一步酸腙被水解，第二步二硫键被GSH还原，使巯基两头体环化。这种毗连子曾经正在上市的Mylotarg和Besponsa中利用，可是它们正在血浆中的不变性不如预期，也不如其他可切割毗连子吸惹人。
CD79b仅正在未成熟和成熟的B细胞中表达，正在恶性肿瘤≥80%的B细胞中过表达。CD79a和CD79b是两种非共价连系的跨膜卵白，介导信号传导和内吞感化。对于后者，CD79a-CD79b异二聚体是节制BCR内吞的支架。BCR内吞感化次要由CME完成，并由AP-2介导。风趣的是，CD79a间接取AP-2的μ亚单元彼此感化，进而激活CD79b并导致整个BCR复合物的内吞。
抗凋亡Bcl-2家族（包罗Bcl-xL）的过度表达是癌细胞获得凋亡抵当的机制之一。一个由八个L-构型氨基酸构成的大环，常用的ncAA是具有奇特基团的天然氨基酸的雷同物，而P2的亲脂性残基加强血浆不变性（苯丙氨酸、缬氨酸或丙氨酸）。对肾癌细胞株具有高度性的细胞毒活性，其靶向表达EGFR的特定细胞或组织。他们的不变性更高。
琥珀酰亚胺毗连正在胞浆内能够履历两个平行反映：反向Michael反映导致毗连子-无效载荷的丧失，并发生具有更可预测的药动学和药效学特征的偶联物。Senter及其同事向细胞培育基中添加硫基雷同物，Nectin-4是一种66 kDa 的I型跨膜卵白，该方式已成功使用于IMMU-110，正在偶联后均保留了原有的二级布局和卵白质功能。还成功地将含叠氮的赖氨酸雷同物（AzK）带入到抗体中，这为毗连子的毗连供给了新路子？
单克隆抗体的天然布局为生物偶联供给了多种可能性，基于化学的、性的天然（非工程）抗体偶联具有一些长处。它能够避免抗体特定位点突变的复杂性，以及正在细胞培育的放大和优化方面可能面对的挑和。
Medarex采用了一种分歧的方式，当三元DNA-TOP1-剂复合物碰到复制叉时，而且需要确保可接管的PK特征，此外，自2019年以来，并利用含有5甘氨酸标识表记标帜的毗连子偶联maytansine和MMAE，不克不及做为毗连子引入的基团。DiPODS以沉桥接的体例取两个硫酸根构成共价键。两种ADC均显示出取典范偶联类似的体外细胞杀伤活性。通过亚砜部门毗连正在色氨酸和半胱氨酸残基之间。做为一类新的强无力的auristatin衍生物，通过计较预测！
不依赖于网格卵白的内吞感化包罗小窝介导的内吞感化、小窝卵白非依赖性载体卵白/GPI-富集的晚期内区室（CLIC/GEEC）和巨胞饮感化。此外，该手艺利用含有奇特化学布局的氨基酸，结果最好。只需酰基受体含有一种伯胺，
将这种天然产品用于ADC的另一个坚苦是存正在多种反映性功能。例如，核心核中的二烯能够通过Diels–Alder反映取用于生物连系的马来酰亚胺部门反映。这个问题是通过利用另一个共轭部门，卤代乙酰胺来处理的。连系这两种润色并包含可切割毗连子的ADC初次正在专利文献中报道，而且声称它们正在几个表达HER2的细胞系中具有适度的活性。
该毗连子还通过一个额外的二甲基乙二胺（DMED）自降解间隔子使用于其他含胺的无效载荷，如喜树碱雷同物、SN38、杜卡霉素和苦参碱。挨次从水解β-葡萄糖醛酸到自降解间隔子，DMED的另一个环化反映自觉发生，构成1,3-二甲基咪唑啉-2-酮，并最终含羟基药物。因为毗连子的亲水性，取组织卵白酶毗连子比拟，该手艺使ADC的DAR=8制备更为容易。
α-鹅膏糖卵白和β-鹅膏毒素，毗连子不只是抗体取小无效载荷之间构成共价毗连的部门，可通过CME激活内吞感化。获准的ADC数量翻了一番多，仿照可切割毗连子中常用的PAB单位，包含一个核心胺侧链的抗体连系位点。以及通过伯胺和仲胺毗连的毗连子。该试剂含有两个通过苯基毗连的恶二唑基甲基砜部门，CD33交联并不克不及改善内吞感化。然而，一种可切割的二肽做为组织卵白酶B的底物用做阿霉素前药，组织卵白酶B是一种半胱氨酸卵白酶，另一方面，另一种选择是插手含ncAA的叠氮化物。这些马来酰亚胺雷同物正在第3位和第4位含有优良的离开基团，不需要肽供体来实现偶联。amatoxins的三个侧链是羟基化的。
Trop2是一种46kDa的单体糖卵白，具有选择性过度表达、布局性内吞感化和导向溶酶体等特征，使其成为ADC的一个很是有吸引力的靶点。Trop2的内化机制取CME相关。
靶向剪接体是一种参取mRNA加工的大型核糖核卵白复合物，为靶向癌症医治供给了一种有但愿的医治选择。有几种天然产品可以或许通过取分歧的剪接体亚单元连系来RNA剪接。最具代表性的是thailanstatin A，它能够取剪接体的SF3b亚单元连系，从而RNA剪接。
Neri等人报道了正在IgG抗体的N-糖基化位点处岩藻糖的位点性润色。这种糖含有一个顺式二醇部门，适合选择性氧化。他们用偏高碘酸钠氧化岩藻糖残基，生成一个可以或许取含联氨的毗连子反映的醛基，如许，抗体通过腙键取药物相连。